發布時間:2023-11-17 11:17:46
序言:作為思想的載體和知識的探索者,寫作是一種獨特的藝術,我們為您準備了不同風格的5篇生物化學知識,期待它們能激發您的靈感。
生物化學的教材多以“章”的形式組織,介紹糖類、脂類、蛋白質、核酸等生物分子的結構、性質、代謝等內容。生物化學從本質上來講是一門化學。筆者長期從事有機化學和生物化學的教學工作,根據個人體會,從化學的角度提出了生物化學的幾個重要知識規律,對于從整體、宏觀上把握生物化學知識有非常好的幫助作用。
一、官能團羥基的重要性
單糖的羥基具有重要的作用。在多糖中,單糖通過羥基形成了糖苷鍵。如淀粉,葡萄糖是通過1號羥基與4號羥基形成糖苷鍵的。單糖成環之后除兩個羥基用來形成糖苷鍵外,其余的羥基也會有各自重要的用途。以N-乙酰胞壁酸為例,1、4號羥基用來成苷鍵,2號羥基發生乙酰化,3號羥基用來與乳酸2號羥基成苷鍵。以核糖為例,成環的核糖仍保留有1,2,3,5號四個羥基,其中3號羥基,5號羥基與磷酸形成3,5磷酸二酯鍵,1號羥基與堿基形成糖苷鍵,RNA中保留了2號羥基,DNA則脫掉了2號羥基中的氧以便和RNA加以區別。多糖與核酸都是依靠羥基才能形成高分子化合物。盡管脂酰甘油酯不需要羥基形成高分子化合物,但甘油是通過羥基與脂肪酸形成酯鍵的。對聚合成蛋白質的氨基酸來說,羥基雖然沒有用來成鍵,但部分氨基酸,如絲氨酸的羥基作為必需基團,對酶的催化起重要作用。單糖、氨基酸、核苷酸都可以形成多聚體,對生命物質的形成有重要的作用,脂類分子雖然不能形成高聚物,但可以形成微囊,從而為細胞的形成奠定基礎。
二、 C、H、O、N元素的代謝
C、H、O、N是組成生物大分子的四種重要的元素,對人類來說,核酸中的N元素以尿酸的形式排出體外,氨基酸中N以尿素的形式排出體外。氨基酸脫去N元素后余下的α-酮酸及脂肪酸進入到三羧酸循環進行代謝,羧基中的C和O元素以CO2的形式排出體外;H元素則傳遞給O以H2O的形式代謝,同時,在線粒體內膜兩側形成質子濃度差,生成ATP。
三、空間結構與氫鍵
氫鍵在維持生物大分子的空間結構中起重要的作用。多糖空間結構、蛋白質的二級結構、堿基配對均與氫鍵相關。螺旋是一種最常見空間結構類型,部分多糖如淀粉、糖元都會形成螺旋結構,蛋白質二級結構也包括α螺旋,DNA分子也是雙螺旋結構。纖維素多糖與β折疊片類似,由氫鍵維持平行的分子之間的作用力。
四、生物分子物性的選擇
生物分子的構型具有選擇性,絕大多數天然的單糖為D型、氨基酸為L型。絕大多數的DNA都是右手螺旋。以上幾點為筆者初步總結的四種生物大分子之間聯系和區別,相信讀者在學習生物化學的過程中,如果用心體會,還會有更多的發現。用心學習,用心體會,用心總結,我們就會發現有很多貫穿于生物化學之中的規律,就能化繁為簡,學好這門課程。
五、不斷改進教學方法,提高生物化學教學質量
氮是許多生物過程的基本元素,它存在于所有組成蛋白質的氨基酸中,是構成諸如DNA等核酸的基本元素之一。在植物中,大量的氮素被用于合成可進行光合作用供植物生長的葉綠素分子。
空氣中含有大約78%的氮氣,占有絕大部分的氮元素。大氣中的分子態氮被還原成氨,這一過程叫做固氮作用。沒有固氮作用,大氣中的分子態氮就不能被植物吸收利用。固氮作用是將氣態的游離態氮轉變為可被有機體吸收的化合態氮的過程。其中一部分氮素由人工固定,還有一部分氮素由閃電等高能作用固定,絕大部分的氮素被共生或非共生的固氮微生物固定。這些微生物(主要是細菌,此外還包括少數藍藻和放線菌)擁有可促進氮氣和氫氣合成為氨的固氮酶,生成的氨再被這種細菌或植物通過一系列的轉化形成自身組織的一部分。例如根瘤菌,寄生在豆科植物的根瘤中。這些細菌和植物建立了一種互利共生的關系,為植物生產氨以換取糖類。其它植物則利用根系從土壤中吸收硝酸根離子或銨離子以獲取氮素。動物體內的所有氮素均直接或間接通過植物獲得。
氨或NH4+來源于腐生生物對死亡動植物器官的分解。動植物的遺體,排泄物以及殘落物中的有機氮被微生物分解后形成氨,這一過程叫做氨化作用。在富含氧氣的土壤中,這些離子將首先被亞硝化細菌轉化為亞硝酸根離子(NO2-),然后被硝化細菌轉化為硝酸根離子(NO3-)。這一過程叫做硝化作用。氨化作用和硝化作用產生的無機鹽,都能被植物吸收利用。在氧氣不足的條件下,土壤中的硝酸鹽被反硝化細菌等多種微生物還原成亞硝酸鹽,并且進一步還原成分子態氮,分子態氮則返回到大氣中,這一過程叫做反硝化作用。
銨離子很容易被固定在土壤尤其是腐殖質和粘土中。而硝酸根離子和亞硝酸根離子則因它們自身的負電性而不容易被固定在正離子的交換點(主要是腐殖質)多于負離子的土壤中。在雨后或灌溉后,流失可溶性離子(如硝酸根和亞硝酸根)到地下水的情況經常會發生。地下水中硝酸鹽含量的提高關系到飲用水的安全,因為水中過量的硝酸根離子會影響嬰幼兒血液中的氧濃度并導致高鐵血紅蛋白癥或藍嬰綜合征(Blue-baby Syndrome)。如果地下水流向溪川,富硝酸鹽的地下水會導致地面水體的富營養作用,使得藍藻菌和其它藻類大量繁殖,導致水生生物因缺氧而大量死亡。此外富營養作用還可破壞生物多樣性,同時由于微生物的活動產生有毒代謝產物影響水生生物的生存。近來頻出的赤潮和水華現象就是水中N、P含量超標所致。
基礎生物化學是生物學學科中一門十分重要的基礎實驗課程.是學生掌握生物化學基礎知識、基本技能,培養學生觀察問題、分析問題和解決問題的有效途徑,是培養學生科研能力、科技創新能力的平臺.在近幾年來的基礎生物化學實驗教學中,針對地方本科院校學生的學習基礎和水平,依據生物化學大綱和培養計劃的要求,我們在教學內容、教學過程、成績評定等方面進行了探討與嘗試,目的是通過實驗,培養學生科學研究的正確態度、嚴謹的科研作風和求實的科學精神.加深對生物化學基本理論、基本知識的理解與運用,提高學生觀察問題、分析問題、解決問題以及動手操作的能力.掌握生物化學研究中的一些基本技術,如電泳技術、層析技術、分光光度計的使用和離心技術等.學會運用該課程的基本理論和基本技術進行實驗設計,確保基礎生物化學實驗教學質量的提高和教學目標的實現.
1提高生物化學實驗教學質量的實踐方法
1.1構建科學、合理的實驗教學模塊在教學內容構建上我們依據教學大綱,借鑒同類學校的實踐經驗,在基本把握“三性”實驗內涵和特征的基礎上,通過對實驗內容的整合與篩選,構建了基礎性、綜合性和設計性三個層次的模塊教學內容(表略).其中基礎性、綜合性、設計性實驗分別占計劃學時的43.75%、43.75%和12.5%.
1.2建立學習預知制度在實驗教學中,我們采用宏觀和微觀相結合的方式進行教學預知.既在實驗教學伊始,任課教師首先向學生介紹本課程的教學計劃、教學內容、教學目標、教學要求等方面的問題,實現學習的宏觀預知.每次實驗結束,告知學生下一次實驗的內容,學生根據要求進行課前預習,并寫出預習筆記,課上檢查,實現微觀預知.
1.3建立循序漸進的課堂教學實施過程教學過程是教學活動展開的過程.在整個課堂教學中,我們進行了精心的設計,整個課堂教學包括以下幾個環節(圖略).實驗報告點評主要是針對報告中反映的共性問題進行點評.問題討論是教師圍繞實驗目的、原理、實驗操作過程,依據學生已有的知識,結合學生在實驗中可能會遇到的問題提出討論題目,在學生預習的基礎上進行討論.同時,也讓學生根據預習提出問題,開展討論.建立學生-教師-學生共同探討問題的互動形式.理論方面的問題解決后,學生開始獨立操作,教師在學生的實驗操作中巡回指導,解決實驗中遇到的操作、技術等方面的問題,并對每項實驗結果當場給分.
1.4搭建較為科學、客觀的學習成績評定體系.單純一次考試確定學生的實驗成績是不客觀的,我們在實驗成績評定中以“實驗預習、課堂討論、實驗操作與結果、實驗報告”為成績評定的四要素.實驗預習主要考查學生學習的主動性和學習態度.課堂討論主要考查學生對知識的理解和學習能力.實驗操作與結果主要考查學生的動手能力、技能水平和解決問題的能力.實驗報告主要考查學生運用知識分析問題和判斷問題的能力及科技論文寫作的能力.根據各要素考查目的和權重,確定給分比例和給分點.
1.5開展實驗方法的探究活動在實驗教學的過程中,我們對某些實驗的方法進行了完善與修改.比如,在紙層析分離氨基酸實驗中,用昆蟲針直接別制濾紙圓桶,取代了用針線縫合圓桶的方法;在酵母RNA的提取分離及組分鑒定及動物肝臟DNA的提取與分離實驗中,材料減少1/3或1/2;離心由3000r/min,離心15min改為2500r/min,離心5min;減壓抽慮改為離心;在肌糖原酵解和脂肪酸β-氧化兩個基礎實驗中,我們以反應時間為變量,在其它條件不變的前提下,讓學生進行分組實驗,然后比較其結果,確定理想的反應時間,結果肌糖原酵解反應0.5小時,脂肪酸β-氧化反應1小時即可達到理想的效果.在反應時間上比原實驗分別縮短1小時和0.5小時.
2提高生物化學實驗教學質量的實踐結果
教學模塊的構建,使教學內容進行了合理的整合與優選,減少了驗證性實驗的比例,增加了綜合性和設計性實驗的比例,為學生運用知識,訓練技能,提高分析問題、解決問題的能力構建了良好的內容體系.學習預知制度的建立,使學生知道自己在實驗之前要做什么,解決了學生被動接受知識,被動進行實驗的局面,為課堂教學過程的順利進行提供了保證.實驗報告的點評,學生們不但知道了報告內容的對與否,更主要的是通過一段時間的點評和引導,使實驗報告寫作的質量不斷提高,為實驗設計,論文的寫作奠定了一定的基礎.課堂討論,使學生學會了如何學習,怎樣提出問題,怎樣解決問題.并通過討論使學生在預習的基礎上,對實驗目的、實驗原理、實驗操作中遇到的方法和技術問題加深了理解.使學生明明白白的進行操作,并能推測、判斷結果和現象.學生獨立實驗,教師巡回指導,克服了學生對演示實驗的依賴性.實驗操作與結果的當堂打分,調動了學生操作的積極性和主動性,為全面提高實驗課堂教學質量提供了保證.實驗成績評定體系的實施,使學生的學習過程始終處在興奮狀態.考核的結果真實、全面、公平.實驗方法的完善與修改,使一些實驗方法由繁變簡,實驗時間由長變短,實驗效果更明顯.節省了實驗時間和材料,提高了實驗質量.
3提高生物化學實驗教學質量的實踐思考
提高生物化學實驗教學質量是生物化學教學改革的核心問題,也是從事本課程的教師一直以來十分關注的問題,教師在積極的嘗試與探討中積累了許多經驗.作為新建本科院校,提高生物化學實驗教學質量要把握以下幾個方面的問題.
3.1整合優化實驗教學內容,是提高教學質量的重要要素新建本科院校,絕大多數是在專科院校的基礎上發展起來的,基礎比較薄弱,辦學相對比較封閉,硬件建設還有一定的制約,要想提高生物化學實驗教學質量,首先要在科學制定合理的生物化學實驗大綱基礎上,掌握時代脈搏,借鑒其它兄弟院校的經驗,科學的整合優化實驗內容,構建實驗教學模塊十分重要.在基礎性實驗教學模塊中,要選擇一些具有代表性的驗證性實驗和實驗技術上比較單一的實驗項目.通過基礎性實驗設計,使學生在加深對生物化學理論理解的同時,初步學會如何運用理論分析現象,得出驗證性的結論;掌握生物化學實驗技術中較常運用的層析技術、電泳技術、紫外可見分光光度計、離心等技術的原理和方法.為綜合性實驗和設計性實驗的進行奠定一定的理論和技能基礎.綜合性實驗是實驗難度較大、實驗所需的時間較長、實驗要求高,具有多個知識點、多種實驗方法和實驗手段的實驗項目.通過綜合性實驗的訓練,培養學生綜合性的實驗技能,觀察、分析、解決問題的能力.為學生進行設計性實驗奠定基礎.設計性實驗是學生實驗目標的升華.在設計性實驗的進行中,首先,教師要從實驗室的現有條件出發,根據學生的情況分類指導.教師要給定實驗目的、實驗條件,在教師指導下學生自己設計方案、選擇實驗方法、實驗器材、擬定實驗操作程序,自己加以實驗并對實驗結果進行分析處理.使學生在完成設計性實驗的過程中了解實驗研究的基本過程,培養學生的科研能力和科技創新能力.
關鍵詞:食品生物化學;實驗教學;教學效果
食品生物化學是高職院校食品專業的基礎課程,是生物化學的分支學科,也是生物化學基本理論應用于食品加工、檢測技術的基礎課程,對于食品專業學生學習后續專業課程,以及將來從事食品加工、食品檢測等方面的研究有著重大影響。食品生物化學實驗課程有著很強的理論性和實踐性,旨在通過系列基礎和綜合性實驗教學,使學生加深對所學理論知識的理解和掌握,同時掌握食品生化專業基礎實驗技能,系統地掌握基礎生物化學實驗儀器的使用方法和相關儀器的操作技能;將生物化學和食品科學理論知識有機融合,提高學生發現問題、應用理論解決問題的能力,具有一定的科學實驗能力和分析問題能力。
1確定實驗教學目標
食品生物化學實驗的目的是在對食品生物化學理論知識加深理解的同時,掌握生物化學基礎實驗技術。通過實驗技能訓練,使學生系統掌握基礎生物化學實驗儀器的使用方法和新型儀器的操作技能。實驗過程中應注重對學生進行以下能力培養:設計實驗方案的能力,正確處理實驗數據并根據實驗結果修正實驗方案的能力,應用知識點并以其解決實際問題的能力。學生素質高低的評判標準不是學到了多少知識,而是學生創新意識、創新能力是否增強,這就是不斷改革完善實驗教學的根本目的。
2合理設置實驗項目
食品生物化學實驗涉及內容廣泛,但由于課時有限,筆者只選擇有代表性、實用性較強的驗證性實驗,如多糖提取及應用、蛋白質的純化、酶的性質、紙層析法分離氨基酸、焦糖化及美拉德反應的應用等項目。經過階段性的實驗教學,為進一步強化實驗技能訓練,培養學生創新能力,使其適應社會科學發展需要,筆者重新整合了實驗內容,提高了綜合性實驗的比例,增設了“微生物酶的分離純化及檢測技術”和“天然活性物質黃酮的提取、純化及抗氧化特性研究”綜合性實驗;結合蛋白質產品的研究與開發,設置了“酶對蛋白質水解作用”研究性開放實驗。綜合性實驗涵蓋了柱層析技術、凝膠電泳技術、液相色譜檢測技術、蛋白質檢測、酶活力檢測、糖含量檢測的實驗技能訓練以及各種相關實驗數據的處理運算訓練。實驗教學內容改革的漸進深化,使食品生物化學實驗內容更加充實和具有實用性。
3理論知識與學科應用研究課題相結合
理論知識與學科應用研究課題的融合,是理論聯系實踐的有效途徑,涵蓋了兩方面的意義:(1)以理論指導實踐,設計實驗項目,解決實驗中出現的問題;(2)通過實踐驗證知識的準確性和真實性[1]。學生圍繞實驗內容,帶著問題從課本、參考文獻以及網絡中了解學科領域及相關行業科技發展信息,提高學生科學設計與評價實驗結果的能力,使學生的學習狀態處于求知欲增強和自學能力提高的良性循環中。教師與學生交流科研經驗及實驗技能的關鍵點,形成師生互動的場面。食品生物化學實驗項目,如“天然活性物質黃酮的提取”“果膠的提取及凝膠特性”“果蔬加工酶促褐變的抑制”“酶對蛋白質水解作用”“油脂的乳化”等就是結合科研課題構建的實驗內容。開設的綜合性實驗,其過程貫穿著樣品提取、純化、定量分析及應用研究等環節,系統反映了科學研究的全過程。
4采用多元化教學模式
4.1多媒體教學
制作和引進了多媒體演示課件,將原來抽象、復雜的生化反應和機理,用圖像和動畫生動表現出來,使學生可以更直觀地理解教學內容,從而提高教學質量。由于該課程含有大量的化學反應和復雜的物質與能量代謝過程,學生普遍反映理論課程知識不易理解和記憶,同時也給實驗教學帶來不便[2]。因此,筆者制作了食品生物化學實驗課程多媒體視頻課件,內容包括關鍵基礎理論提要,實驗儀器設備操作演示,實驗數據處理、圖譜分析的方法,從而幫助學生熟悉食品生物化學實驗單元操作的實驗過程,了解不同型號、類型實驗儀器設備的使用方法,加深對理論知識的理解和記憶,既激發了學生學習興趣,又促進其鍛煉動手能力,達到形象、生動展示實驗教學內容的目的。
4.2加強師生互動
實驗前要求學生圍繞實驗項目,查閱資料了解實驗內容,做好預習,課堂上教師重點講解或演示實驗的一些關鍵操作,指出實驗過程中易出現的問題。實驗過程以學生動手為主,充分發揮學生主觀能動性,對于一些以組為單位完成的綜合性實驗,要求學生分工明確,履行各自職責,對于實驗過程中出現的問題教師及時給予指導。實驗結束時,教師提出一些綜合性的思考題,讓學生以書面形式解答,針對實驗報告中出現的問題,教師及時在實驗課上進行總結、啟發和點評。
4.3成立開放實驗室
成立開放實驗室,鼓勵學生利用開放實驗室進行實驗研究,激發學生學習興趣。學生可在開放實驗室進行一些探索性實驗,可以是自己設計的實驗、指導教師的科研課題、食品生物化學課程開設的實驗項目等。學生自己設計實驗步驟、進行實驗準備及實施,對于實驗中遇到的問題和疑問及時查找原因,研究改進措施;教師在學生實驗過程中給予積極的幫助和指導。開放實驗室,為學生提供了一個更為廣闊的舞臺,能挖掘學生潛能,培養學生探索科學的能力,提高學生思維能力和實驗技能,有利于提高實驗教學質量。
5結語
新世紀對人才素質提出了更高要求。為此,我們必須轉變教育思想、更新教育觀念。教學方式改革只是一種有益的嘗試,學生能力培養涉及多方面。食品生物化學實驗教學改革以培養學生創新能力和綜合能力為重點目標,通過教學改革,學生獨立分析問題、解決問題的能力以及專業實驗技能得到明顯提高,得到了學生的普遍認同[3]。但實驗教學改革是一項長期工作,要發揮其作用,教師需不斷提高業務水平,認真總結各階段的實驗教學工作,做到理論學習和實踐技能并重,激發學生學習興趣,挖掘學生潛能,從而培養出高素質的專業人才。
參考文獻:
[1]高建華,寧正祥,袁爾東,等.食品生物化學實驗課程教學改革探索[J].安徽農業科學,2011,39(32):20266-20267.
[2]劉志貞,趙建濱,張悅紅.提高生物化學實驗教學質量的思考[J].山西醫科大學學報,2007,9(2):176-178.
關鍵詞:高職;就業;生物化學教學
在高職生物化學教學中,老師一定要更加重視學生專業素質與能力的提高,加強互動教學方法、實踐教學方法的運用,提高學生的實踐能力。在實際教學中老師一定要加強對傳統教學模式的創新,加強互動教學模式、多媒體技術、講解引導教學模式等多種教學模式的協調,進而促進學生自主學習能力的提高,增強學生的就業競爭力,促進社會與經濟的可持續發展。
一、高職就業趨勢下生物化學教學現狀
1.現階段我國就業市場高職學生的就業現狀
隨著我國社會經濟體制改革的逐漸深入,我國社會就業結構也出現了一定的變化,大學生就業壓力越來越大。在此形勢下加強培養高職學生的綜合能力與素質是十分必要的,這滿足了社會對高素質生物化學人才的需求。在就業形勢越來越嚴峻的情況下,高職學生在面對就業壓力的時候,表現的形式也各不相同。如“專升本”模式,一些高職學生為了突破就業困難的現狀,選擇進行“專升本”學習,根據相關調查顯示,近些年來高職學生“專升本”的趨勢正在逐漸上升,這就是高職學生面對就業壓力的主要表現形式。一些沒有做好就業準備的高職學生,就非常容易選擇繼續教育的方式,面對嚴峻的就業形勢。
在高職學生就業形勢中還有一部分學生因為自身專業素質的制約,無法達到社會崗位的需求,只能在一些企業基層部門中就業。選擇在企業基層部門中進行工作的學生,最為主要的原因可能就是缺少專業的理論知識和實踐能力,只可以擔當基層工作。在此社會發展形勢下高職學生就業問題受到了社會各界人士的關注,在高職院校實際教學中更加重視學生實踐能力的培養,如果學生缺少一定的專業知識與實踐能力,必然會影響學生的成功就業。
2.高職生物化學教學中存在的問題
在高職院校教學過程中生物化學知識更加傾向于實踐理論教學,其主要就是對生物化學變化過程進行研究的一門課程,是生物學專業中的基礎課程,只有在學生學好這一內容的基礎上,才可以保證生物化學理論與實踐的有機結合,進而保證學生在畢業之后,可以更加順利地開展工作。但是在生物化學結構的影響下,其知識點太過復雜,所以大部分學生都很難進行深入的了解。在一些高職院校中越來越普及創新型人才的培養,也就是加強學生生物化學實踐能力的提高,在實際教學中,縮短了理論知識的教學時間,進而導致學生在理論知識方面存在著一定的欠缺,也就無法滿足學生生物化學實踐能力的提高。所以在生物化學教學中一定要加強教學模式的轉變,在重視學生實踐能力提高的同時,加強學生對理論知識的學習,促進學生綜合能力與素質的提高。
二、生物化學教學模式的優化
1.營造“愉快”的課堂教學氛圍
通過營造愉快、輕松的課堂教學氛圍,有助于加強學生對生物化學理論知識的學習,進而培養學生的實踐能力,全面提高學生的綜合素質與能力。在開展實際教學的時候,老師一定要重視教學模式的優化。如,在應用互動式教學模式的時候,一定要有效地激發學生的學習興趣。如,在學習“蛋白質的一、二、三、四級結構特點”這一內容的時候,老師可以通過多媒體對現實與客觀存在的事物進行聯系,讓學生更加深入地了解生物化學知識。在教學過程中可以先引入化學家馬爾德清蛋白分析結論,通過情景圖片的展示,引入3D生物活性蛋白質模型,之后針對蛋白質元素結構進行教學,聯系生活中一日三餐中的牛肉、豬肉等,保證學生可以理解相關知識,進而展開相應的學習。這樣的教學模式,不僅可以調動學生學習的興趣與熱情,還可以提高學生學習的積極性,對生物化學理論知識進行深入的學習,達到預期教學目標。
2.病例分析實踐教學
生物化學課程是一門具有很強實踐性的學科,老師一定要加強理論與臨床實踐的結合,通過相應的問題情境解決教學問題,提高學生的學習成績。如,利用蛋白質代謝知識分析肝性腦病的預防,加強學生對理論知識的理解,并且對理論知識進行靈活的運用,增強了生物化學教學的實效性。
總之,在高職院校教學中老師一定要結合高職學生的個性、學習狀況等方面,制定相應的教學內容與方法,同時根據就業市場的實際需求,協調理論知識與實踐能力的學習,讓學生具備一定的綜合素質與能力,進而為高職學生的成功就業奠定堅實的基礎。
參考文獻:
[1]朱裕生,袁光建,任云青.高職高專教育“案例教學”應用探索[J].天津市財貿管理干部學院學報,2010(01).
[2]姚芳.高職就業趨勢下的生物化學教學探究[J].西江月:中旬刊,2013(29).